Progerin/Lamin A qPCR Detection Kit

Descrizione

Hutchinson-Gilford Progeria Syndrome (HGPS) è una rara e fatale malattia genetica caratterizzata dall’insorgenza di invecchiamento precoce nell’infanzia. La maggioranza dei casi è sporadica and è causata da una ricorrente mutazione de novo dominante nel gene LMNA codificante per la proteina Lamina A. Questa mutazione attiva costitutivamente un sito criptico che causa l’espressione di una forma mutata di Lamina A nota come progerina. La possibilità di quantificare accuratamente i trascritti mutati potrebbe dare ai ricercatori l’abilità di accertare gli effetti in vitro di sostanze sperimentali in grado di gestire l’espressione di progerina in cellule HGPS; inoltre, i ricercatori potrebbero comparare la quantità di trascritto prodotto in differenti linee cellulari o a differenti stadi di crescita e correlare la produzione di proteina mutante con quella wilt-type e/o alla progressione della malattia. Progerin/Lamin A qPCR Detection Kit permette due possibili metodi di analisi: quantitativo e comparativo.
Due controlli standard positivi per Lamina A e progerina sono inclusi nel kit per effettuare le curve di calibrazione necessarie per derivare il numero di copie dei due trascritti target all’interno del campione.
I primers inclusi nella Lamin A Master Mix ottimizzata riconoscono una regione specifica di cDNA presente nella sequenza codificante la Lamina A umana che invece è assente nella sequenza codificante la progerina umana. Da questa reazione di amplificazione si ottiene un prodotto di PCR a 179bp. La Progerin Master Mix ottimizzata include primers che riconoscono una regione specifica del cDNA umano adiacente alla delezione di 150 nucleotidi che caratterizza il trascritto di progerina. Da questa reazione di amplificazione si origina un prodotto di PCR di 160bp. I primers sono stati accuratamente progettati con lo scopo di massimizzare l’abilità di discriminare la progerina dalla Lamina A wild-type.